Fryderyk Sanger -Frederick Sanger

Fryderyk Sanger

Fryderyk Sanger2.jpg
Urodzić się ( 13.08.1918 )13 sierpnia 1918
Rendcomb , Gloucestershire, Anglia
Zmarł 19 listopada 2013 (2013-11-19)(w wieku 95 lat)
Cambridge , Anglia
Alma Mater Uniwersytet Cambridge (doktorat)
Znany z
Nagrody
Kariera naukowa
Pola Biochemia
Instytucje
Praca dyplomowa Metabolizm aminokwasu lizyny w organizmie zwierzęcia  (1943)
Doradca doktorski Albert Neuberger
Doktoranci

Frederick Sanger OM CH CBE FRS FAA ( / ˈ s æ ŋ ər / ; 13 sierpnia 1918 – 19 listopada 2013) był angielskim biochemikiem , który dwukrotnie zdobył Nagrodę Nobla w dziedzinie chemii . Jest jedną z zaledwie dwóch osób, które zrobiły to w tej samej kategorii (druga to John Bardeen z fizyki) i czwartą osobą z dwiema nagrodami Nobla . Zdobył Nagrodę w 1958 r. za badania nad określeniem struktury wielu białek, przede wszystkim insuliny , a połowę nagrody z 1980 r. podzielił z Walterem Gilbertem za wynalezienie pierwszej w historii techniki sekwencjonowania DNA , nadal szeroko stosowanej.

Wczesne życie i edukacja

Frederick Sanger urodził się 13 sierpnia 1918 roku w Rendcomb , małej wiosce w Gloucestershire w Anglii, jako drugi syn Fredericka Sangera, lekarza rodzinnego , i jego żony Cicely Sanger (z domu Crewdson). Był jednym z trójki dzieci. Jego brat Theodore był tylko o rok starszy, a siostra May (Mary) była o pięć lat młodsza. Jego ojciec pracował jako anglikański misjonarz medyczny w Chinach, ale wrócił do Anglii z powodu złego stanu zdrowia. Miał 40 lat w 1916 roku, kiedy poślubił młodszą o cztery lata Cicely. Ojciec Sangera nawrócił się na kwakierizm wkrótce po narodzinach jego dwóch synów i wychowywał je jako kwakrów. Matka Sangera była córką zamożnego producenta bawełny i miała pochodzenie kwakrów, ale nie była kwakrem.

Kiedy Sanger miał około pięciu lat, rodzina przeniosła się do małej wioski Tanworth-in-Arden w Warwickshire. Rodzina była dość zamożna i zatrudniała guwernantkę do nauczania dzieci. W 1927, w wieku dziewięciu lat, został wysłany do Downs School , domowej szkoły przygotowawczej prowadzonej przez kwakrów w pobliżu Malvern . Jego brat Theo był o rok przed nim w tej samej szkole. W 1932, w wieku 14 lat, został wysłany do niedawno utworzonej Szkoły Bryanston w Dorset. To wykorzystywało system Daltona i miał bardziej liberalny reżim, który bardzo preferował Sanger. W szkole lubił swoich nauczycieli, a szczególnie lubił przedmioty naukowe. Będąc w stanie ukończyć świadectwo szkolne rok wcześniej, za co otrzymał siedem punktów, Sanger mógł spędzić większość ostatniego roku szkoły na eksperymentowaniu w laboratorium wraz ze swoim mistrzem chemii, Geoffreyem Ordishem, który pierwotnie studiował na Uniwersytecie w Cambridge i był badaczem w Laboratorium Cavendisha . Praca z Ordishem była odświeżającą odmianą od siedzenia i studiowania książek i obudziła w Sangerze chęć kontynuowania kariery naukowej. W 1935, przed wyjazdem na studia, Sanger został wysłany do Schule Schloss Salem w południowych Niemczech w ramach programu wymiany. Szkoła położyła duży nacisk na lekkoatletykę, co spowodowało, że Sanger był znacznie dalej w materiale kursu w porównaniu z innymi uczniami. Był zszokowany, gdy dowiedział się, że każdy dzień zaczynał się od odczytów z Mein Kampf Hitlera , po których nastąpiło salutowanie Sieg Heil .

W 1936 Sanger udał się do St John's College w Cambridge, aby studiować nauki przyrodnicze. Jego ojciec uczęszczał do tej samej uczelni. W części I swojego Tripos uczęszczał na kursy z fizyki, chemii, biochemii i matematyki, ale zmagał się z fizyką i matematyką. Wielu innych uczniów uczyło się w szkole więcej matematyki. Na drugim roku fizykę zastąpił fizjologią. Zajęło mu trzy lata, aby uzyskać część I. Za część II studiował biochemię i otrzymał wyróżnienie I klasy. Biochemia była stosunkowo nowym wydziałem założonym przez Gowlanda Hopkinsa z entuzjastycznymi wykładowcami, wśród których byli Malcolm Dixon , Joseph Needham i Ernest Baldwin .

Oboje jego rodzice zmarli na raka podczas pierwszych dwóch lat w Cambridge. Jego ojciec miał 60 lat, a matka 58. Jako studenta, na przekonania Sangera duży wpływ miało jego wychowanie kwakierskie. Był pacyfistą i członkiem Związku Zastawu Pokoju . To dzięki jego zaangażowaniu w Cambridge Scientists Anti-War Group poznał swoją przyszłą żonę, Joan Howe, która studiowała ekonomię w Newnham College . Zabiegali o to, gdy studiował do egzaminów na część II, i ożenił się, gdy ukończył szkołę w grudniu 1940 roku. Sanger, choć wychowany i pod wpływem jego religijnego wychowania, później zaczął tracić z oczu sposób, w jaki spokrewniony był z kwakierami. Zaczął patrzeć na świat przez bardziej naukową soczewkę, a wraz z rozwojem badań i rozwoju naukowego powoli oddalał się od wiary, w której dorastał. Nie ma nic poza szacunkiem dla zakonników i twierdzi, że zabrał z tego dwie rzeczy: prawdę i szacunek dla wszelkiego życia. Na mocy ustawy o szkoleniu wojskowym z 1939 r. został tymczasowo zarejestrowany jako odmawiający służby wojskowej i ponownie na mocy ustawy z 1939 r. o służbie narodowej (siłach zbrojnych) , zanim trybunał przyznał mu bezwarunkowe zwolnienie ze służby wojskowej. W międzyczasie podjął szkolenie w zakresie pomocy społecznej w centrum Quaker, Spicelands, Devon i krótko służył jako sanitariusz w szpitalu.

Sanger rozpoczął studia doktoranckie w październiku 1940 roku pod kierunkiem NW "Bill" Pirie . Jego projekt polegał na zbadaniu, czy jadalne białko można uzyskać z trawy. Po niespełna miesiącu Pirie opuścił wydział, a jego doradcą został Albert Neuberger . Sanger zmienił swój projekt badawczy, aby zbadać metabolizm lizyny i bardziej praktyczny problem dotyczący azotu w ziemniakach. Jego praca magisterska nosiła tytuł „Metabolizm aminokwasu lizyny w organizmie zwierzęcia”. Został zbadany przez Charlesa Haringtona i Alberta Charlesa Chibnalla i otrzymał doktorat w 1943 roku.

Badania i kariera

Sekwencja aminokwasowa insuliny bydlęcej

Sekwencjonowanie insuliny

Neuberger przeniósł się do National Institute for Medical Research w Londynie, ale Sanger pozostał w Cambridge iw 1943 dołączył do grupy Charlesa Chibnalla , chemika zajmującego się białkami, który niedawno objął katedrę w Departamencie Biochemii. Chibnall wykonał już pewne prace nad składem aminokwasowym insuliny bydlęcej i zasugerował, aby Sanger przyjrzał się grupom aminowym w białku. Insulinę można było kupić w sieci aptek Boots i była jednym z niewielu białek dostępnych w czystej postaci. Do tego czasu Sanger sam się finansował. W grupie Chibnall początkowo był wspierany przez Medical Research Council , a następnie od 1944 do 1951 przez Beit Memorial Fellowship for Medical Research .

Pierwszym triumfem Sangera było określenie pełnej sekwencji aminokwasowej dwóch łańcuchów polipeptydowych insuliny bydlęcej, A i B, odpowiednio w 1952 i 1951 roku. Wcześniej powszechnie zakładano, że białka są nieco amorficzne. Określając te sekwencje, Sanger udowodnił, że białka mają określony skład chemiczny.

Aby dojść do tego punktu, Sanger udoskonalił metodę chromatografii podziałowej opracowaną przez Richarda Laurence'a Millingtona Synge'a i Archera Johna Portera Martina w celu określenia składu aminokwasów w wełnie. Sanger użył odczynnika chemicznego 1-fluoro-2,4-dinitrobenzenu (obecnie znanego również jako odczynnik Sangera , fluorodinitrobenzenu, FDNB lub DNFB), pochodzącego z badań trujących gazów prowadzonych przez Bernharda Charlesa Saundersa na Wydziale Chemii Uniwersytetu w Cambridge. Odczynnik Sangera okazał się skuteczny w znakowaniu N-końcowej grupy aminowej na jednym końcu łańcucha polipeptydowego. Następnie częściowo zhydrolizował insulinę do krótkich peptydów za pomocą kwasu solnego lub enzymu takiego jak trypsyna . Mieszaninę peptydów frakcjonowano w dwóch wymiarach na arkuszu bibuły filtracyjnej, najpierw przez elektroforezę w jednym wymiarze, a następnie, prostopadle do tego, przez chromatografię w drugim. Różne fragmenty peptydowe insuliny, wykryte za pomocą ninhydryny , przesuwały się w różne pozycje na papierze, tworząc wyraźny wzór, który Sanger nazwał „odciskami palców”. Peptyd z N-końca można było rozpoznać po żółtym zabarwieniu nadanym przez znacznik FDNB, a tożsamość znakowanego aminokwasu na końcu peptydu można było określić przez całkowitą hydrolizę kwasową i odkrycie, który dinitrofenylo-aminokwas tam był.

Powtarzając tego typu procedurę, Sanger był w stanie określić sekwencje wielu peptydów wytworzonych różnymi metodami początkowej częściowej hydrolizy. Można je następnie złożyć w dłuższe sekwencje, aby wywnioskować pełną strukturę insuliny. Wreszcie, ponieważ łańcuchy A i B są fizjologicznie nieaktywne bez trzech łączących wiązań dwusiarczkowych (dwa międzyłańcuchowe, jeden wewnątrzłańcuchowy w A), Sanger i współpracownicy określili swoje przypisanie w 1955 roku. Głównym wnioskiem Sangera było to, że dwa łańcuchy polipeptydowe białka insuliny precyzyjne sekwencje aminokwasowe, a co za tym idzie, że każde białko ma unikalną sekwencję. To właśnie to osiągnięcie przyniosło mu pierwszą nagrodę Nobla w dziedzinie chemii w 1958 roku. Odkrycie to było kluczowe dla późniejszej hipotezy sekwencji Cricka dotyczącej opracowania koncepcji kodowania białek przez DNA.

Sekwencjonowanie RNA

Od 1951 Sanger był członkiem personelu zewnętrznego Rady Badań Medycznych, a kiedy w 1962 roku otwarto Pracownię Biologii Molekularnej , przeniósł się ze swoich laboratoriów w Zakładzie Biochemii uniwersytetu na ostatnie piętro nowego budynku. Został szefem działu Chemii Białka.

Przed przeprowadzką Sanger zaczął badać możliwość sekwencjonowania cząsteczek RNA i zaczął opracowywać metody oddzielania fragmentów rybonukleotydów generowanych przez specyficzne nukleazy. Tę pracę wykonał, próbując udoskonalić techniki sekwencjonowania, które opracował podczas pracy nad insuliną.

Kluczowym wyzwaniem w pracy było znalezienie czystego fragmentu RNA do sekwencjonowania. W trakcie prac odkrył w 1964 wraz z Kjeldem Marckerem tRNA formylometioniny , które inicjuje syntezę białek w bakteriach. Został pokonany w wyścigu o pierwsze sekwencjonowanie cząsteczki tRNA przez grupę kierowaną przez Roberta Holleya z Cornell University , który opublikował sekwencję 77 rybonukleotydów alaninowego tRNA z Saccharomyces cerevisiae w 1965 roku. Do 1967 roku grupa Sangera określiła sekwencja nukleotydowa rybosomalnego RNA 5S z Escherichia coli , małego RNA o długości 120 nukleotydów.

Sekwencjonowanie DNA

Sanger następnie zajął się sekwencjonowaniem DNA, co wymagałoby zupełnie innego podejścia. Przyjrzał się różnym sposobom wykorzystania polimerazy DNA I z E. coli do kopiowania jednoniciowego DNA. W 1975 roku wraz z Alanem Coulsonem opublikował procedurę sekwencjonowania z użyciem polimerazy DNA z radioznakowanymi nukleotydami, którą nazwał techniką „Plus i Minus”. Wiązało się to z dwoma ściśle powiązanymi metodami, które wygenerowały krótkie oligonukleotydy o określonych końcach 3'. Mogłyby one być frakcjonowane przez elektroforezę w żelu poliakryloamidowym i wizualizowane za pomocą autoradiografii . Procedura mogła zsekwencjonować do 80 nukleotydów za jednym razem i była dużym ulepszeniem tego, co było wcześniej, ale nadal była bardzo pracochłonna. Niemniej jednak jego grupie udało się zsekwencjonować większość z 5386 nukleotydów jednoniciowego bakteriofaga φX174 . Był to pierwszy w pełni zsekwencjonowany genom oparty na DNA. Ku swemu zdziwieniu odkryli, że regiony kodujące niektórych genów nakładają się na siebie.

W 1977 Sanger i współpracownicy wprowadzili „dideoksy” metodę zakańczania łańcucha do sekwencjonowania cząsteczek DNA, znaną również jako „ metoda Sangera ”. To był wielki przełom i pozwolił na szybkie i dokładne sekwencjonowanie długich odcinków DNA. Dzięki temu otrzymał drugą nagrodę Nobla w dziedzinie chemii w 1980 roku, którą dzielił z Walterem Gilbertem i Paulem Bergiem . Nowa metoda została wykorzystana przez Sangera i współpracowników do sekwencjonowania ludzkiego mitochondrialnego DNA (16 569 par zasad) i bakteriofaga λ (48 502 par zasad). Metoda dideoksy została ostatecznie wykorzystana do sekwencjonowania całego ludzkiego genomu .

Doktoranci

W trakcie swojej kariery Sanger nadzorował ponad dziesięciu doktorantów, z których dwóch zdobyło również Nagrody Nobla. Jego pierwszym absolwentem był Rodney Porter , który dołączył do grupy badawczej w 1947 roku. Później Porter otrzymał w 1972 roku Nagrodę Nobla w dziedzinie fizjologii lub medycyny z Geraldem Edelmanem za jego pracę nad chemiczną strukturą przeciwciał . Elizabeth Blackburn odbyła studia doktoranckie w laboratorium Sangera w latach 1971-1974. Nagrodę Nobla z 2009 roku w dziedzinie fizjologii lub medycyny dzieliła z Carol W. Greider i Jackiem W. Szostakiem za pracę nad telomerami i działaniem telomerazy .

Nagrody i wyróżnienia

Od 2015 r. Sanger jest jedyną osobą, która dwukrotnie otrzymała Nagrodę Nobla w dziedzinie chemii i jedną z zaledwie czterech dwukrotnych laureatów Nagrody Nobla: Pozostałe trzy to Marie Curie ( fizyka , 1903 i chemia , 1911), Linus Pauling ( Chemia , 1954 i Pokój , 1962) i John Bardeen (dwukrotnie Fizyka , 1956 i 1972).

Na jego cześć nosi nazwę Wellcome Trust Sanger Institute (dawniej Sanger Center ).

Życie osobiste

Małżeństwo i rodzina

Sanger wyszła za mąż za Margaret Joan Howe (nie mylić z Margaret Sanger ) w 1940 roku. Zmarła w 2012 roku. Mieli troje dzieci — Robin, urodzona w 1943, Peter urodzona w 1946 i Sally Joan urodzona w 1960. Powiedział, że jego żona miała troje dzieci. „przyczynił się do swojej pracy bardziej niż ktokolwiek inny, zapewniając spokojny i szczęśliwy dom”.

Poźniejsze życie

Instytut Sangera

Sanger przeszedł na emeryturę w 1983 roku, w wieku 65 lat, do swojego domu „Far Leys” w Swaffham Bulbeck pod Cambridge.

W 1992 roku Wellcome Trust i Medical Research Council założyły Sanger Center (obecnie Sanger Institute ), nazwane jego imieniem. Instytut znajduje się w Wellcome Trust Genome Campus niedaleko Hinxton , zaledwie kilka kilometrów od domu Sangera. Zgodził się, by Centrum nazwano jego imieniem, gdy poprosił Johna Sulstona , dyrektora założyciela, ale ostrzegł: „Lepiej, żeby było dobrze”. Został otwarty osobiście przez Sangera 4 października 1993 r., zatrudniając mniej niż 50 osób, a następnie przejął wiodącą rolę w sekwencjonowaniu ludzkiego genomu . Instytut liczy obecnie ponad 900 osób i jest jednym z największych na świecie ośrodków badań genomicznych .

Sanger powiedział, że nie znalazł dowodów na istnienie Boga, więc został agnostykiem. W wywiadzie opublikowanym w gazecie Times w 2000 r. cytuje się słowa Sangera: „Mój ojciec był oddanym kwakierem, a ja wychowałem się jako kwakier i dla nich prawda jest bardzo ważna. Odszedłem od tych przekonań – jedno jest oczywiście szukam prawdy, ale potrzeba na to dowodów. Nawet gdybym chciał wierzyć w Boga, byłoby to dla mnie bardzo trudne. Musiałbym zobaczyć dowód”.

Odrzucił propozycję tytułu szlacheckiego , ponieważ nie chciał, by zwracano się do niego „Sir”. Cytuje się, że mówi: „Rycerstwo czyni cię innym, czyż nie, a ja nie chcę być inny”. W 1986 roku przyjął przyjęcie do Orderu Zasługi , który może mieć tylko 24 żyjących członków.

W 2007 roku Brytyjskie Towarzystwo Biochemiczne otrzymało grant od Wellcome Trust na skatalogowanie i zachowanie 35 zeszytów laboratoryjnych, w których Sanger zapisał swoje badania z lat 1944-1983. możesz mieć nadzieję, że się spotkasz”, spędzał czas na ogrodnictwie w swoim domu w Cambridgeshire .

Sanger zmarł we śnie w Addenbrooke's Hospital w Cambridge 19 listopada 2013 roku. Jak zauważył w swoim nekrologu, określił siebie jako „tylko faceta, który grzebał w laboratorium” i „naukowo niezbyt błyskotliwy”.

Wybrane publikacje

  • Neuberger, A.; Sanger, F. (1942), "Azot ziemniaka", Biochemical Journal , 36 (7-9): 662-671, doi : 10.1042/bj0360662 , PMC  1266851 , PMID  16747571.
  • Neuberger, A.; Sanger, F. (1944), "Metabolizm lizyny", Biochemical Journal , 38 (1): 119-125, doi : 10.1042/bj0380119 , PMC  1258037 , PMID  16747737.
  • Sanger, F. (1945), "Wolne grupy aminowe insuliny", Biochemical Journal , 39 (5): 507-515, doi : 10.1042/bj0390507 , PMC  1258275 , PMID  16747948.
  • Sanger, F. (1947), "Utlenianie insuliny przez kwas nadmrówkowy", Nature , 160 (4061): 295-296, Bibcode : 1947Natur.160..295S , doi : 10.1038/160295b0 , PMID  20344639 , S2CID  4127677.
  • Porter, RR; Sanger, F. (1948), "Wolne grupy aminowe hemoglobiny", Biochemical Journal , 42 (2): 287-294, doi : 10.1042/bj0420287 , PMC  1258669 , PMID  16748281.
  • Sanger, F. (1949a), „Frakcjonowanie utlenionej insuliny”, Biochemical Journal , 44 (1): 126-128, doi : 10.1042/bj0440126 , PMC  1274818 , PMID  16748471.
  • Sanger, F. (1949b), „Końcowe peptydy insuliny”, Biochemical Journal , 45 (5): 563-574, doi : 10.1042/bj0450563 , PMC  1275055 , PMID  15396627.
  • Sanger, F.; Tuppy, H. (1951a), „Sekwencja aminokwasów w łańcuchu fenyloalanylowym insuliny. 1. Identyfikacja niższych peptydów z częściowych hydrolizatów”, Biochemical Journal , 49 (4): 463-481, doi : 10.1042/bj0490463 , PMC  1197535 , PMID  14886310.
  • Sanger, F.; Tuppy, H. (1951b), „Sekwencja aminokwasów w łańcuchu fenyloalanylowym insuliny. 2. Badanie peptydów z hydrolizatów enzymatycznych”, Biochemical Journal , 49 (4): 481–490, doi : 10.1042/bj0490481 , PMC  1197536 , PMID  14886311.
  • Sanger, F.; Thompson, EOP (1953a), „Sekwencja aminokwasów w łańcuchu glicylowym insuliny. 1. Identyfikacja niższych peptydów z częściowych hydrolizatów”, Biochemical Journal , 53 (3): 353-366, doi : 10.1042/bj0530353 , PMC  1198157 , PMID  13032078.
  • Sanger, F.; Thompson, EOP (1953b), „Sekwencja aminokwasów w łańcuchu glicylowym insuliny. 2. Badanie peptydów z hydrolizatów enzymatycznych”, Biochemical Journal , 53 (3): 366-374, doi : 10.1042/bj0530366 , PMC  1198158 , PMID  13032079.
  • Sanger, F.; Thompson, EOP; Kitai, R. (1955), „Grupy amidowe insuliny”, Biochemical Journal , 59 (3): 509-518, doi : 10.1042/bj0590509 , PMC  1216278 , PMID  14363129.
  • Ryle, AP; Sanger, F.; Smith, LF; Kitai, R. (1955), "Wiązania dwusiarczkowe insuliny", Biochemical Journal , 60 (4): 541-556, doi : 10.1042/bj0600541 , PMC  1216151 , PMID  13249947.
  • Brązowy, H.; Sanger, F.; Kitai, R. (1955), „Struktura insuliny świńskiej i owczej”, Biochemical Journal , 60 (4): 556-565, doi : 10.1042/bj0600556 , PMC  1216152 , PMID  13249948.
  • Sanger, F. (1959), „Chemistry of Insulin: określenie struktury insuliny otwiera drogę do lepszego zrozumienia procesów życiowych”, Science , 129 (3359): 1340–1344, Bibcode : 1959Sci...129.1340G , doi : 10.1126/ nauka.129.3359.1340 , PMID  13658959.
  • Milstein, C.; Sanger, F. (1961), "sekwencja aminokwasów w centrum aktywnym fosfoglukomutazy", Biochemical Journal , 79 (3): 456-469, doi : 10.1042/bj0790456 , PMC  1205670 , PMID  13771000.
  • Marcker, K.; Sanger, F. (1964), „ N -formylo-metionylo-S-RNA”, Journal of Molecular Biology , 8 (6): 835-840, doi : 10.1016/S0022-2836(64)80164-9 , PMID  14187409.
  • Sanger, F.; Brownlee, GG; Barrell, BG (1965), "Dwuwymiarowa procedura frakcjonowania radioaktywnych nukleotydów", Journal of Molecular Biology , 13 (2): 373-398, doi : 10.1016/S0022-2836 (65) 80104-8 , PMID  5325727.
  • Brownlee, GG; Sanger, F.; Barrell, BG (1967), „Sekwencja nukleotydowa 5S-rybosomalnego RNA z Escherichia coli ”, Nature , 215 (5102): 735-736, Bibcode : 1967Natur.215..735B , doi : 10.1038/215735a0 , PMID  4862513 , S2CID  4270186.
  • Brownlee, GG; Sanger, F. (1967), „sekwencje nukleotydowe z rybosomalnego RNA o niskiej masie cząsteczkowej Escherichia coli ”, Journal of Molecular Biology , 23 (3): 337-353, doi : 10.1016/S0022-2836 (67) 80109-8 , PMID  4291728.
  • Brownlee, GG; Sanger, F.; Barrell, BG (1968), „Sekwencja 5S rybosomalnego kwasu rybonukleinowego”, Journal of Molecular Biology , 34 (3): 379-412, doi : 10.1016/0022-2836 (68) 90168-X , PMID  4938553.
  • Adams, JM; Jeppesena, PG; Sanger, F.; Barrell, BG (1969), „Sekwencja nukleotydowa z cistronu białka płaszcza bakteriofaga R17 RNA”, Nature , 223 (5210): 1009-1014, Bibcode : 1969Natur.223.1009A , doi : 10.1038/2231009a0 , PMID  5811898 , S2CID  4152602.
  • Beczka, BG; Sanger, F. (1969), „sekwencja fenyloalaniny tRNA z E. coli ”, FEBS Letters , 3 (4): 275-278, doi : 10.1016/0014-5793 (69) 80157-2 , PMID  11947028 , S2CID  34155866.
  • Jeppesena, PG; Beczka, BG; Sanger, F.; Coulson, AR (1972), „Sekwencje nukleotydowe dwóch fragmentów z cistronu białka otoczki kwasu rybonukleinowego bakteriofaga R17”, Biochemical Journal , 128 (5): 993–1006, doi : 10.1042/bj1280993h , PMC  1173988 , PMID  4566195.
  • Sanger, F.; Donelson, JE; Coulson, AR; Kössel, H.; Fischer, D. (1973), „Zastosowanie polimerazy DNA I Primed przez syntetyczny oligonukleotyd w celu określenia sekwencji nukleotydowej w DNA faga f1”, Proceedings of the National Academy of Sciences USA , 70 (4): 1209-1213, Bibcode : 1973PNAS...70.1209S , doi : 10.1073/pnas.70.4.1209 , PMC  433459 , PMID  4577794.
  • Sanger, F.; Coulson, AR (1975), „Szybka metoda określania sekwencji w DNA przez syntezę z polimerazą DNA”, Journal of Molecular Biology , 94 (3): 441-448, doi : 10.1016/0022-2836 (75) 90213- 2 , PMID  1100841.
  • Sanger, F.; Nicklen, S.; Coulson, AR (1977), „DNA Sequencing with chain-terminating inhibitors”, Proceedings of the National Academy of Sciences USA , 74 (12): 5463-5467, Bibcode : 1977PNAS...74.5463S , doi : 10.1073/pnas. 74.12.5463 , PMC  431765 , PMID  271968. Według bazy danych Instytutu Informacji Naukowej (ISI), do października 2010 r. artykuł ten był cytowany ponad 64 000 razy.
  • Sanger, F.; powietrze, GM; Beczka, BG; Brązowy, Holandia; Coulson, AR; Fiddes, Kalifornia; Hutchinson, Kalifornia; Slocombe, PM; Smith, M. (1977), „Sekwencja nukleotydowa bakteriofaga φX174 DNA”, Naturę , 265 (5596): 687-695, Bibcode : 1977Natur.265..687S , doi : 10.1038/265687a0 , PMID  870828 , S2CID  4206886.
  • Sanger, F.; Coulson, AR (1978), „Zastosowanie cienkich żeli akrylamidowych do sekwencjonowania DNA”, FEBS Letters , 87 (1): 107-110, doi : 10.1016/0014-5793 (78) 80145-8 , PMID  631324 , S2CID  1620755.
  • Sanger, F.; Coulson, AR; Beczka, BG; Smith, AJ; Roe, BA (1980), „Klonowanie jednoniciowego bakteriofaga jako pomoc w szybkim sekwencjonowaniu DNA”, Journal of Molecular Biology , 143 (2): 161-178, doi : 10.1016/0022-2836 (80) 90196-5 , PMID  6260957.
  • Anderson, S.; Bankier, AT; Beczka, BG; De Bruijn, MH; Coulson, AR; Drouin, J.; Eperon, IC; Nierlich, DP; Ikra, BA; Sanger, F.; Schreier, PH; Smith, AJ; Staden, R.; Young, IG (1981), „Sekwencja i organizacja ludzkiego genomu mitochondrialnego”, Nature , 290 (5806): 457-465, Bibcode : 1981Natur.290..457A , doi : 10.1038/290457a0 , PMID  7219534 , S2CID  4355527.
  • Anderson, S.; De Bruijn, MH; Coulson, AR; Eperon, IC; Sanger, F.; Young, IG ( 1982 ) , „Complete sequence of byvine mitochondrial DNA . 1 , PMID 7120390 .
  • Sanger, F.; Coulson, AR; Hong, GF; Wzgórze, DF ; Petersen, GB (1982), „Sekwencja nukleotydowa bakteriofaga λ DNA”, Journal of Molecular Biology , 162 (4): 729-773, doi : 10.1016/0022-2836 (82) 90546-0 , PMID  6221115.
  • Sanger, F. (1988), „Sekwencje, sekwencje i sekwencje”, Annual Review of Biochemistry , 57 : 1-28, doi : 10.1146/annurev.bi.57.070188.000245 , PMID  2460023.

Bibliografia

Dalsza lektura

Zewnętrzne linki