Negatywna plama - Negative stain

Barwieniu negatywnym jest znaną metodą, często stosowane w diagnostyce mikroskopii na kontrastowych cienką próbkę płynem optycznie nieprzezroczysta. W tej technice, w tle jest zabrudzona, pozostawiając nienaruszone rzeczywiste próbki, a tym samym widoczny. Kontrastuje to z „pozytywne barwienie”, w którym rzeczywista próbki jest barwione.

Na jasnym polu mikroskopu , barwienie negatywne przeprowadza się zazwyczaj za pomocą czarnego tuszu, takich jak nigrozyny i tuszu płynu. Próbce, takie jak mokre bakteryjnej kultury rozprowadza się na płytce szklanej, miesza się z barwnika negatywnego i pozostawiono do wyschnięcia. Patrząc z mikroskopem komórek bakteryjnych, a może ich zarodniki , pojawiają się światła na ciemnym tle otaczającego. Alternatywna metoda została opracowana przy użyciu zwykłej wodoodpornej oznakowanie pióro dostarczyć plamę negatywny.

W przypadku mikroskopu elektronowego , nieprzezroczystość dla elektronów wiąże się z liczbą atomową , to znaczy, liczbę protonów. Niektóre odpowiednie negatywne obejmują plamy molibdenian amonu , octanu uranylu , uranylu mrówczan , kwas fosfowolframowy , tetratlenek osmu , tetratlenek żelazicyjanku i auroglucothionate . Zostały one wybrane, ponieważ rozpraszają elektrony, a także silnie adsorbuje do materii biologicznej dobrze. Struktury, które mogą być negatywnie zabarwione są znacznie mniejsze niż te badane z mikroskopem świetlnym. W tym przypadku, sposób służy do wyświetlania wirusów , bakterii, bakterii wici , biologiczne błony struktur i białka lub agregatów białka, które mają niską moc elektronowego rozpraszania. Niektóre plamy, takie jak tetratlenek osmu i tetratlenek żelazicyjanku są bardzo aktywne chemicznie. Jako silnych utleniaczy, że sieciowanie lipidów, głównie w wyniku reakcji z nienasyconymi wiązaniami węgiel-węgiel, i w ten sposób obie poprawek błon biologicznych w miejscu w próbkach tkanki i jednocześnie je zabarwić.

Wybór negatywnej plamę w mikroskopii elektronowej może być bardzo ważne. Wczesne badanie wirusów roślinnych z wykorzystaniem negatywnie zabarwione dipów liści z rośliny chorej wykazało tylko kuliste wirusy z jedną plamę i tylko wirusy prętowych z innym. Zweryfikowana wniosek, że roślina ta cierpiał mieszanej infekcji przez dwa oddzielne wirusów. Negatywna barwienie zarówno na poziomie mikroskopu elektronowego mikroskopu i światła nie powinny być wykonywane z zakaźnych organizmów, chyba że są przestrzegane rygorystyczne środki bezpieczeństwa. Barwieniu negatywnym jest zwykle bardzo łagodny sposób wytwarzania, a tym samym nie zmniejsza możliwość zakażenia operatora.

Inne aplikacje

Identyfikacja płytkowej (Ie), z odwróconą micelarnej fazy (M) i odwróconej heksagonalnej cylindry H-II (h) fazy lipidów barwieniu negatywnym.

barwieniu negatywnym transmisyjnej mikroskopii elektronowej również z powodzeniem stosować do badania i oznaczania wodnych płytkowych agregatów lipidowych, takich jak liposomy (le), odwrócone micele sferyczne (M) i odwróconej heksagonalnej HII cylindryczny (h) fazy (patrz figura powyżej).

Bibliografia

Zewnętrzne linki

• „Negatywna barwienia dla manekinów” . Źródło 2009-06-06 .
• „Negatywna barwienie” . Zarchiwizowane z oryginałem na 2012-12-25 . Źródło 2009-06-06 .